Ed perméabilisation

[cagetteomax]

Heeelp ! Le concours approche et je suis complètement perdue au niveau de la permeabilisation des cellules, en ED je ne sais jamais quand il faut permeabiliser ou non, est ce que c'est possible d'avoir un petit récap ?

[alr13]

<blockquote class="ipsBlockquote" data-author="cagetteomax" data-cid="76554" data-time="1510686385">
Heeelp ! Le concours approche et je suis complètement perdue au niveau de la permeabilisation des cellules, en ED je ne sais jamais quand il faut permeabiliser ou non, est ce que c'est possible d'avoir un petit récap ?</blockquote>Pas sur mais je dirais que si tu veux étudier des protéines qui sont à l'intérieur de la cellule tu dois perméabiliser la membrane plasmique (faire des trous a l'aide d'agents détergents) afin que les produits mis en réaction puissent interagir avec leur cible dans la cellule.

A l'inverse si tu veux étudier des protéines membranaires tu devras pas la perméabiliser car si tu perfores la mp bah les réactifs ne pourront pas réagir avec leur cible a la mp.

[mrgt]

[quote="alr13"]
Pas sur mais je dirais que si tu veux étudier des protéines qui sont à l'intérieur de la cellule tu dois perméabiliser la membrane plasmique (faire des trous a l'aide d'agents détergents) afin que les produits mis en réaction puissent interagir avec leur cible dans la cellule.

A l'inverse si tu veux étudier des protéines membranaires tu devras pas la perméabiliser car si tu perfores la mp bah les réactifs ne pourront pas réagir avec leur cible a la mp.
[/quote]
C'est exactement ça

[cagetteomax]

ah d'accord merci beaucoup ! et du coup rien a voir avec le fait qu'on peut observer le déplacement ou pas ?

[alr13]

<blockquote class="ipsBlockquote" data-author="cagetteomax" data-cid="76559" data-time="1510694919">
ah d'accord merci beaucoup ! et du coup rien a voir avec le fait qu'on peut observer le déplacement ou pas ?</blockquote>


De rien

qu'entends-tu par déplacement ?

[cagetteomax]

Par exemple quand on veut observer un flux comme le flux membranaire vectoriel et permanent on étudie le "déplacement" de la protéine du coup j'ai jamais trop compris si c'était une nouvelle expérience a chaque fois parce que si on perméabilise la cellule on la tue du coup c'est pas possible de voir l'évolution de la protéine

[alr13]

<blockquote class="ipsBlockquote" data-author="cagetteomax" data-cid="76562" data-time="1510730463">
Par exemple quand on veut observer un flux comme le flux membranaire vectoriel et permanent on étudie le "déplacement" de la protéine du coup j'ai jamais trop compris si c'était une nouvelle expérience a chaque fois parce que si on perméabilise la cellule on la tue du coup c'est pas possible de voir l'évolution de la protéine</blockquote>
Pour les études du fvmp c'est par la technique du pulse chase avec l'incubation dans un milieu de culture ,au départ, d'acides aminés radioactif couplés a des billes d'or qui ne peuvent pas être phagocytées (dans la phase de pulse) puis remise d'acides aminés non radioactifs dans ce meme milieu de culture (au cours de la phase de chase) pour voir l'évolution de la synthèse (tu sais c'est l'expérience qu'on a vu dans le cours du système endomembranaire où dans l'expérience y'a un passage des acides du re vers le golgi etc etc..

Après te dire si c'est complémentaire ou pas des autres techniques comme on a vu dans l'ed je ne sais pas.. mais je pense que ce sont des expériences différentes


Mais bon ce qui est sur c'est que ça ne dénature pas la membrane plasmique car comme tu dis si la mp est poreuse on ne peut pas faire ce genre d'étude.

A confirmer par un tuteur quand même car c'est une réponse approximative sans avoir vérifié le cours que je t'ai donné !

[cagetteomax]

merciiii tu gères

[emo]

Salut, alors le post est assez vieux mais il porte un peu sur la même question. En effet concernant l'ED d'aujourd'hui nous avons eu une question similaire quant à la Perméabilisation membranaire de GFP, 9b-GFB et de TOM20.
 
Enfin bref, malgré les explications si dessus je n'arrive toujours pas à comprendre dans quelle condition il faut perméabiliser la membrane ou pas ?
 
Une âme charitable pour essayer à nouveau ? Merci beaucoup !!

[Niss]

[quote="emo"]
Salut, alors le post est assez vieux mais il porte un peu sur la même question. En effet concernant l'ED d'aujourd'hui nous avons eu une question similaire quant à la Perméabilisation membranaire de GFP, 9b-GFB et de TOM20.
 
Enfin bref, malgré les explications si dessus je n'arrive toujours pas à comprendre dans quelle condition il faut perméabiliser la membrane ou pas ?
 
Une âme charitable pour essayer à nouveau ? Merci beaucoup !!
[/quote]
Même question, j'ai pas compris par rapport à l'ED d'aujourd'hui, si quelqu'un pourrait expliquer ce serait top